Miten DNA muuntelu tapahtuu käytännössä?

puff745

Terve.
Haluan tietää DNAn muuntelun kaikki vaiheet käytännössä, se kiinostaa minua ja varmasti moni muukin on yrittänyt saada sitä selville. Nämä vaiheet olisi kiva tietää käytännössä ja kuvilla varustettuna. En ymmärrä miten ne voidaan toteuttaa käytännössä.

Hankitaan DNA näyte.
Leikataan osiin entsyymeillä.
Valitaan haluttu osa.
Viljellään haluttua osaa bakteereilla.
Siirretään haluttu DNA pätkä liittäjäentsyymin kanssa muokattavaan soluun joko:
- bakteerilla
- viruksella
- dna pyssyllä
Valmis.

Tiedän jo kuinka DNAta saadaan runsaasta näytemäärästä:
http://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction/howto/
tuolla sivulla se selitetään selkeästi ja järkeenkäyvästi.

Entä näytteen saaminen pienestä määrästä, yksittäisen solun DNA ei ole puutikulla siirettävissä, eihän?
Mistä ihmeestä entsyymit saadaan?
Kuinka niitä valmistetaan?
Kuinka erotella DNA palaset ja valita haluttu osa?
Miten DNA lisätään bakteeriviljelmään, ruiskullako?
Kuinka tarkka niiden lisääminen on, riittääkö jos dna:ta liottaa siinä ja sitten siirtää?
Miten DNA osan sisältävä virus lisätään muokattavaan soluun, ruiskullako jälleen samaan petri maljaan ja odotetaan jos se virus sattuisi osumaan siihen soluun?

Isot yritykset varmasti hankkivat entsyymit purkitettuina mutta minua kiinostaa mistä niitä saadaan ja valmistetaan käytännössä.
Kiitos asiallisille vastauksille.

1

364

Äänestä

    Vastaukset

    Anonyymi (Kirjaudu / Rekisteröidy)
    5000
    • molekyylibiologi

      "näytteen saaminen pienestä määrästä, yksittäisen solun DNA ei ole puutikulla siirettävissä, eihän?"
      Pienikin määrä liittää jos sen saa kopioitua riittävän monta kertaa. Tähän prosessiin soveltuu PCR, polymeraasiketjureaktio.
      http://fi.wikipedia.org/wiki/Polymeraasiketjureaktio

      "Mistä ihmeestä entsyymit saadaan?
      Kuinka niitä valmistetaan?
      Isot yritykset varmasti hankkivat entsyymit purkitettuina mutta minua kiinostaa mistä niitä saadaan ja valmistetaan käytännössä."
      Kauan, kauan sitten, noin 1980 luvulle asti, entsyymit piti puhdistaa niiden alkuperäisistä lähteistä - soluista mitkä saattoivat olla kasvi-, eläin-, tai mikrobiperäisiä. Esimerkiksi lysotsyymiä (bakteerisolujen hajottamiseen käytettävää entsyymiä) voidaan saada kananmunan valkuaisesta.
      http://en.wikipedia.org/wiki/Lysozyme

      Nykyisin hyvin suuri osa entsyymeistä tuotetaan mikrobien avulla. Entsyymit voivat olla joko mikrobien "omia" ns. "villityyppi" muotoja, tai sitten entsyymien geenit on siirretty geeniteknisesti jostain aivan muusta lähteestä jolloin puhutaan "rekombinantti" muodoista.
      http://fi.wikipedia.org/wiki/Rekombinantti-DNA

      Aineiden (entsyymien, aineenvaihduntatuotteiden, lääkeaineiden, yms.) tuottamisesta mikrobien avulla käytetään yleistermiä fermentointi. Käytännössä tämä tarkoittaa sitä, että mikrobeja kasvatetaan suurissa sammioissa antamalla niille halpoja ravinteita ja riittävän pitkän kasvatusajan jälkeen haluttu tuote kerätään talteen. Yleisesti tunnettuja fermentointi prosesseja ovat alkoholin ja maitotuotteiden valmistus.
      http://en.wikipedia.org/wiki/Fermentation

      "Kuinka erotella DNA palaset ja valita haluttu osa?"
      Yksi mahdollinen, ja hyvin yleisesti käytetty, menetelmä on AgaroosiGeeliElektroforeesi (AGE). Siinä DNA molekyylit pistetään liikkumaan liivatteen kaltaisen hyytelön lävitse tasavirta-sähkökentässä, jolloin eri kokoiset molekyylit liikkuvat eri nopeuksilla ja näinollen päätyvät eri kohtiin geeliä. Halutun kokoiset DNA molekyylit saadaan tämän jälkeen kerättyä talteen liuottamalla ne irti hyytelöpaloista.
      http://en.wikipedia.org/wiki/Gel_electrophoresis

      "Miten DNA lisätään bakteeriviljelmään, ruiskullako?"
      Ruiskuja käytetään joihinkin DNA sovellutuksiin, kuten keinohedelmöityksiin, mutta harvemmin bakteerien yhteydessä. Yksi yleisesti käytetty menetelmä on elektroporaatio, missä sähköiskun avulla aikaansaadaan reikiä solujen pintaan ja DNA voi tällöin päästä solun sisälle.
      http://en.wikipedia.org/wiki/Electroporation

    Ketjusta on poistettu 0 sääntöjenvastaista viestiä.

    Takaisin ylös

    Luetuimmat keskustelut

    1. Orpo räyhää: kansan on muututtava

      Orpon mukaan kansa ei elä kokoomuksen kanssa samassa todellisuudessa, ja sen vuoksi kansan on muututtava. Kas kun ei san
      Maailman menoa
      103
      2088

    2. Ehkä vähän

      Rakastunut sinuun
      Ikävä
      57
      1251

    3. Kristillinen kaste annetaa upotuskasteena

      Kristillinen upotuskaste perustuu juutalaiseen mikve-kasteeseen, jossa upottaudutaan veden alle kokonaan. Paavali vertas
      Kaste
      162
      1157

    4. Koko kansan kaste Punaisen meren ylityksen aikana

      Koko Israelin 2,5 milj.kansa sai kasteen ja Pyhän Hengen lahjan ylittäessän Punaisen meren. 1.Kor.10 1 Sillä minä en ta
      Kaste
      366
      1127

    5. Sijaiskasteet kuolleitten puolesta

      Paavali teki Korintossa sijaiskasteita kuolletten puolesta eli ns. Mormoninkasteita. 1. Kor. 15:29 Mitä muutoin ne, j
      Kaste
      373
      1049

    6. Martina ja jalkapalloilija2

      Seiska: Martina iski nuoren jalkapalloilijan vuosia sitten. Könysikö milf teinin kanssa?
      Kotimaiset julkkisjuorut
      186
      1023

    7. Nainen, nyt esitän muutaman skenaarion

      Asumme yhdessä ja seurustelemme. 1. On ilta ja olet sohvalla makoilemassa ja räpläät kännykkääsi. Makuuhuoneesta kuulu
      Ikävä
      122
      978

    8. Oikea kaste on syntisten kaste

      Oikea kaste on syntisten kaste. Vain syntisiä tulee kastaa. Itsensä uskoviksi ja vanhurskaiksi julistaneita ei tule ka
      Kaste
      58
      975

    9. Et taida paljoa

      treffeillä käydä? 😆 mieheltä Naiselle
      Ikävä
      94
      969

    10. Kristillinen kaste toimitetaan upottamalla veteen - pään valelukaste ei kelpaa

      Kristillinen upotuskaste perustuu juutalaiseen puhdistautumiseen, jossa upottaudutaan veden alle kokonaan. Paavali verta
      Kaste
      153
      962
    Aihe
    TietosuojaselosteKäyttöehdotEvästeasetuksetSäännöt