Terve.
Haluan tietää DNAn muuntelun kaikki vaiheet käytännössä, se kiinostaa minua ja varmasti moni muukin on yrittänyt saada sitä selville. Nämä vaiheet olisi kiva tietää käytännössä ja kuvilla varustettuna. En ymmärrä miten ne voidaan toteuttaa käytännössä.
Hankitaan DNA näyte.
Leikataan osiin entsyymeillä.
Valitaan haluttu osa.
Viljellään haluttua osaa bakteereilla.
Siirretään haluttu DNA pätkä liittäjäentsyymin kanssa muokattavaan soluun joko:
- bakteerilla
- viruksella
- dna pyssyllä
Valmis.
Tiedän jo kuinka DNAta saadaan runsaasta näytemäärästä:
http://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction/howto/
tuolla sivulla se selitetään selkeästi ja järkeenkäyvästi.
Entä näytteen saaminen pienestä määrästä, yksittäisen solun DNA ei ole puutikulla siirettävissä, eihän?
Mistä ihmeestä entsyymit saadaan?
Kuinka niitä valmistetaan?
Kuinka erotella DNA palaset ja valita haluttu osa?
Miten DNA lisätään bakteeriviljelmään, ruiskullako?
Kuinka tarkka niiden lisääminen on, riittääkö jos dna:ta liottaa siinä ja sitten siirtää?
Miten DNA osan sisältävä virus lisätään muokattavaan soluun, ruiskullako jälleen samaan petri maljaan ja odotetaan jos se virus sattuisi osumaan siihen soluun?
Isot yritykset varmasti hankkivat entsyymit purkitettuina mutta minua kiinostaa mistä niitä saadaan ja valmistetaan käytännössä.
Kiitos asiallisille vastauksille.
Miten DNA muuntelu tapahtuu käytännössä?
1
298
Vastaukset
- molekyylibiologi
"näytteen saaminen pienestä määrästä, yksittäisen solun DNA ei ole puutikulla siirettävissä, eihän?"
Pienikin määrä liittää jos sen saa kopioitua riittävän monta kertaa. Tähän prosessiin soveltuu PCR, polymeraasiketjureaktio.
http://fi.wikipedia.org/wiki/Polymeraasiketjureaktio
"Mistä ihmeestä entsyymit saadaan?
Kuinka niitä valmistetaan?
Isot yritykset varmasti hankkivat entsyymit purkitettuina mutta minua kiinostaa mistä niitä saadaan ja valmistetaan käytännössä."
Kauan, kauan sitten, noin 1980 luvulle asti, entsyymit piti puhdistaa niiden alkuperäisistä lähteistä - soluista mitkä saattoivat olla kasvi-, eläin-, tai mikrobiperäisiä. Esimerkiksi lysotsyymiä (bakteerisolujen hajottamiseen käytettävää entsyymiä) voidaan saada kananmunan valkuaisesta.
http://en.wikipedia.org/wiki/Lysozyme
Nykyisin hyvin suuri osa entsyymeistä tuotetaan mikrobien avulla. Entsyymit voivat olla joko mikrobien "omia" ns. "villityyppi" muotoja, tai sitten entsyymien geenit on siirretty geeniteknisesti jostain aivan muusta lähteestä jolloin puhutaan "rekombinantti" muodoista.
http://fi.wikipedia.org/wiki/Rekombinantti-DNA
Aineiden (entsyymien, aineenvaihduntatuotteiden, lääkeaineiden, yms.) tuottamisesta mikrobien avulla käytetään yleistermiä fermentointi. Käytännössä tämä tarkoittaa sitä, että mikrobeja kasvatetaan suurissa sammioissa antamalla niille halpoja ravinteita ja riittävän pitkän kasvatusajan jälkeen haluttu tuote kerätään talteen. Yleisesti tunnettuja fermentointi prosesseja ovat alkoholin ja maitotuotteiden valmistus.
http://en.wikipedia.org/wiki/Fermentation
"Kuinka erotella DNA palaset ja valita haluttu osa?"
Yksi mahdollinen, ja hyvin yleisesti käytetty, menetelmä on AgaroosiGeeliElektroforeesi (AGE). Siinä DNA molekyylit pistetään liikkumaan liivatteen kaltaisen hyytelön lävitse tasavirta-sähkökentässä, jolloin eri kokoiset molekyylit liikkuvat eri nopeuksilla ja näinollen päätyvät eri kohtiin geeliä. Halutun kokoiset DNA molekyylit saadaan tämän jälkeen kerättyä talteen liuottamalla ne irti hyytelöpaloista.
http://en.wikipedia.org/wiki/Gel_electrophoresis
"Miten DNA lisätään bakteeriviljelmään, ruiskullako?"
Ruiskuja käytetään joihinkin DNA sovellutuksiin, kuten keinohedelmöityksiin, mutta harvemmin bakteerien yhteydessä. Yksi yleisesti käytetty menetelmä on elektroporaatio, missä sähköiskun avulla aikaansaadaan reikiä solujen pintaan ja DNA voi tällöin päästä solun sisälle.
http://en.wikipedia.org/wiki/Electroporation
Ketjusta on poistettu 0 sääntöjenvastaista viestiä.
Luetuimmat keskustelut
Jens Ihlen (ex Kukka) poika todistaa oikeudessa
10:49 "Välit ovat olemattomat" Minkälainen isäsi ja sinun välinen suhde on tällä hetkellä? "Minulla ei ole minkäännäkö2539429Riikka runnoo! Uutta velkaa tänä vuonna 17 mrd. euroa
Tirsk. Nyt kyllä hihityttää kuin pientä eläintä. Riikka takoo maailmanennätyksiä tasaiseen tahtiin. " [Riikka] joutuu1527702K-kaupassa on mukava käydä, kun ei tarvitse katsella köyhiä
vasemmistolaisia, joista monet myös varastavat. Mielellään maksaa vähän enemmän tuotteista K-kaupassa, jotka ovat paljon1515274Suomeen ei kuulu ihmiset jotka ei halua kätellä toisia ihmisiä, koska tämä on vääräuskoinen
Nainen joka ei halunnut kätellä Stubbia on selvästi ääripään muslimi, eli sitä sakkia josta niitä ongelmia koituu. Ulos1514958PS:n Purra teki -JÄTTI-VELAT
* * PS:n Purra teki -JÄTTI-VELAT - ! ja jätti MaksuHuolet -Kansan Maksettavaksi -! *584670Suomessa on ollut suurtyöttömyyttä ennenkin, ja lääkäriin pääsee nykyäänkin
Täällähän oli jonkun sekopään(vas.) juttu, että ennen ei ollut työttömyyttä ja lääkäriin pääsi. Siihen alkoi tietysti ko1054340Kysymys: Kuinka moneen maahan neuvosto-venäjä on hyökännyt
viimeisten 90-vuoden aikana? Ja lähinnä on siis kyse neuvosto-venäjän naapurimaista - kuten Suomesta. Lista on huomatta1284164- 1681978
Nainen, sanotaan että totuus tekee kipeää
Ehkä mutta se voi olla myös se kaikkein kamalin asia kohdata. Kuplassa on turvallista, kun tietää vähemmän on helpompi.91839Valtio lopettaa pienituloisten perheiden kylpylälomien tukemisen
Pienituloiset suomalaiset ovat voineet vuosikymmenten ajan hakea tuettuja lomia terveydellisin, sosiaalisin ja taloudell2901631