Terve.
Haluan tietää DNAn muuntelun kaikki vaiheet käytännössä, se kiinostaa minua ja varmasti moni muukin on yrittänyt saada sitä selville. Nämä vaiheet olisi kiva tietää käytännössä ja kuvilla varustettuna. En ymmärrä miten ne voidaan toteuttaa käytännössä.
Hankitaan DNA näyte.
Leikataan osiin entsyymeillä.
Valitaan haluttu osa.
Viljellään haluttua osaa bakteereilla.
Siirretään haluttu DNA pätkä liittäjäentsyymin kanssa muokattavaan soluun joko:
- bakteerilla
- viruksella
- dna pyssyllä
Valmis.
Tiedän jo kuinka DNAta saadaan runsaasta näytemäärästä:
http://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction/howto/
tuolla sivulla se selitetään selkeästi ja järkeenkäyvästi.
Entä näytteen saaminen pienestä määrästä, yksittäisen solun DNA ei ole puutikulla siirettävissä, eihän?
Mistä ihmeestä entsyymit saadaan?
Kuinka niitä valmistetaan?
Kuinka erotella DNA palaset ja valita haluttu osa?
Miten DNA lisätään bakteeriviljelmään, ruiskullako?
Kuinka tarkka niiden lisääminen on, riittääkö jos dna:ta liottaa siinä ja sitten siirtää?
Miten DNA osan sisältävä virus lisätään muokattavaan soluun, ruiskullako jälleen samaan petri maljaan ja odotetaan jos se virus sattuisi osumaan siihen soluun?
Isot yritykset varmasti hankkivat entsyymit purkitettuina mutta minua kiinostaa mistä niitä saadaan ja valmistetaan käytännössä.
Kiitos asiallisille vastauksille.
Miten DNA muuntelu tapahtuu käytännössä?
1
327
Vastaukset
- molekyylibiologi
"näytteen saaminen pienestä määrästä, yksittäisen solun DNA ei ole puutikulla siirettävissä, eihän?"
Pienikin määrä liittää jos sen saa kopioitua riittävän monta kertaa. Tähän prosessiin soveltuu PCR, polymeraasiketjureaktio.
http://fi.wikipedia.org/wiki/Polymeraasiketjureaktio
"Mistä ihmeestä entsyymit saadaan?
Kuinka niitä valmistetaan?
Isot yritykset varmasti hankkivat entsyymit purkitettuina mutta minua kiinostaa mistä niitä saadaan ja valmistetaan käytännössä."
Kauan, kauan sitten, noin 1980 luvulle asti, entsyymit piti puhdistaa niiden alkuperäisistä lähteistä - soluista mitkä saattoivat olla kasvi-, eläin-, tai mikrobiperäisiä. Esimerkiksi lysotsyymiä (bakteerisolujen hajottamiseen käytettävää entsyymiä) voidaan saada kananmunan valkuaisesta.
http://en.wikipedia.org/wiki/Lysozyme
Nykyisin hyvin suuri osa entsyymeistä tuotetaan mikrobien avulla. Entsyymit voivat olla joko mikrobien "omia" ns. "villityyppi" muotoja, tai sitten entsyymien geenit on siirretty geeniteknisesti jostain aivan muusta lähteestä jolloin puhutaan "rekombinantti" muodoista.
http://fi.wikipedia.org/wiki/Rekombinantti-DNA
Aineiden (entsyymien, aineenvaihduntatuotteiden, lääkeaineiden, yms.) tuottamisesta mikrobien avulla käytetään yleistermiä fermentointi. Käytännössä tämä tarkoittaa sitä, että mikrobeja kasvatetaan suurissa sammioissa antamalla niille halpoja ravinteita ja riittävän pitkän kasvatusajan jälkeen haluttu tuote kerätään talteen. Yleisesti tunnettuja fermentointi prosesseja ovat alkoholin ja maitotuotteiden valmistus.
http://en.wikipedia.org/wiki/Fermentation
"Kuinka erotella DNA palaset ja valita haluttu osa?"
Yksi mahdollinen, ja hyvin yleisesti käytetty, menetelmä on AgaroosiGeeliElektroforeesi (AGE). Siinä DNA molekyylit pistetään liikkumaan liivatteen kaltaisen hyytelön lävitse tasavirta-sähkökentässä, jolloin eri kokoiset molekyylit liikkuvat eri nopeuksilla ja näinollen päätyvät eri kohtiin geeliä. Halutun kokoiset DNA molekyylit saadaan tämän jälkeen kerättyä talteen liuottamalla ne irti hyytelöpaloista.
http://en.wikipedia.org/wiki/Gel_electrophoresis
"Miten DNA lisätään bakteeriviljelmään, ruiskullako?"
Ruiskuja käytetään joihinkin DNA sovellutuksiin, kuten keinohedelmöityksiin, mutta harvemmin bakteerien yhteydessä. Yksi yleisesti käytetty menetelmä on elektroporaatio, missä sähköiskun avulla aikaansaadaan reikiä solujen pintaan ja DNA voi tällöin päästä solun sisälle.
http://en.wikipedia.org/wiki/Electroporation
Ketjusta on poistettu 0 sääntöjenvastaista viestiä.
Luetuimmat keskustelut
Porvarimediat paniikissa demareiden huiman kannatuksen vuoksi
Piti sitten keksiä "nimettömiin lähteisiin" perustuen taas joku satu. Ovat kyllä noloja, ja unohtivat sen, että vaalit1478120KATASTROFI - Tytti Tuppurainen itse yksi pahimmista kiusaajista!!!
STT:n lähteiden mukaan SDP:n eduskuntaryhmän puheenjohtaja Tytti Tuppurainen on käyttäytynyt toistuvasti epäasiallisesti4237151Mikä siinä on ettei persuille leikkaukset käy?
On esitetty leikkauksia mm. haitallisiin maataloustukiin, kuin myös muihin yritystukiin. Säästöjä saataisiin lisäksi lei693663Lääppijä Lindtman jäi kiinni itse teosta
Lindtman kyselemättä ja epäasiallisesti koskettelee viestintäpäällikköä. https://www.is.fi/politiikka/art-20000117808521423311Juuri nyt! Tytti Tuppurainen on käyttäytynyt toistuvasti epäasiallisesti
Ai että mä nautin, Tytti erot vireille! "Käytös on kohdistunut avustajia ja toisia kansanedustajia kohtaan, uutisoi STT1092824Huomaatteko Demari Tytti ei esitä pahoitteluitaan
Samanlainen ilmeisesti kuin Marin eli Uhriutuu no he ovat Demareita ja muiden yläpuolella siis omasta mielestään442358- 1261936
Puolen vuoden koeaika
Voisi toimia meillä. Ensin pitäis selvittää "vaatimukset" puolin ja toisin, ennen kuin mitään aloittaa. Ja matalalla pro231793Turvaan tulleet lähettävät omia lapsiaan vaaraan - hullua
MOT-ohjelman jakso ”Loma vaihtui kahleisiin” kertoi, kuinka Suomessa ja muualla Euroopassa asuvat somaliperheet lähettäv261576Tytti Tuppurainen nöyryyttää avustajiaan
Tytti Tuppurainen nöyryyttää SDP:n eduskuntaryhmän kokouksissa sekä avustajia että kansanedustajia. Hän nolaa ihmisiä ju1821457